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培養(yǎng)基移種操作方法
點(diǎn)擊次數(shù):369 更新時間:2023-10-18

一、斜面培養(yǎng)基移種技術(shù)

(1)材料

瓊脂斜面培養(yǎng)基

經(jīng)分離培養(yǎng)的平板培養(yǎng)物。

(2)方法

①在瓊脂斜面培養(yǎng)基試管上部標(biāo)明移種的菌名(或編號)、接種日期、接種者的組別及代號。

②左手持長有細(xì)菌的平板底,右手持接種環(huán)。接種環(huán)在火焰上滅菌冷卻后,沾取平板劃線上發(fā)育良好的孤立菌落。把平板放回原處,立即用此手取斜面培養(yǎng)基斜持,用右手小指與手掌夾持棉塞,輕輕轉(zhuǎn)動后撥出棉塞,管口通過火焰滅菌。

③將已沾菌的接種環(huán)伸入斜面培養(yǎng)基的管底部的凝固水,沿斜面培養(yǎng)基的表面從底向上劃一直線,然后再從底部向上劃連續(xù)曲折線;也可不劃直線只劃曲折線。取出接種環(huán),管口通過火焰滅菌,塞好棉塞,放試管架上,接種環(huán)火焰滅菌后放下。

向斜面培養(yǎng)基上移種的細(xì)菌如果是生長在斜面培養(yǎng)基上的,或是生長在液體培養(yǎng)基中的,則用左手同時斜持菌種管和斜面培養(yǎng)基兩個管,右手無名指、小指手掌同時拔起夾持二個棉塞。管口及接種環(huán)先經(jīng)火焰滅菌后,從菌種管取菌立即移種到斜面上,塞好棉塞,接種環(huán)火焰滅菌后放下。然后將斜面培養(yǎng)基放37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h。結(jié)果斜面表面形成菌苔。

二、液體培養(yǎng)基移種技術(shù)


用于純種細(xì)菌的增菌及觀察細(xì)菌在液體環(huán)境中的生長特征(混濁生長,表面生長或沉淀生長)

(1)材料

肉湯培養(yǎng)基

斜面培養(yǎng)物(大腸埃希菌、化膿性鏈球菌、枯草芽胞桿菌)

(2)方法

①取接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌、冷卻。

②以“雙管移植法"左手持細(xì)菌斜面培養(yǎng)物和肉湯培養(yǎng)基兩支試管,右手持接種環(huán),按無菌操作法取少量細(xì)菌,將沾菌的接種環(huán)在斜傾的接近液面的管壁上輕輕涂抹研勻,試管直立使沾附在管壁上的細(xì)菌沒入液體中,接種后放37℃恒溫箱中培養(yǎng)。

(3)結(jié)果

①渾濁生長大腸埃希菌菌液呈均勻混濁,管底有少量沉淀。

②沉淀生長化膿性鏈球菌菌液管底有沉淀,菌液無明顯渾濁。

③菌膜生長枯草芽胞桿菌菌液表面形成膜狀物。

三、半固體培養(yǎng)基移種技術(shù)

用于保存菌種及間接檢查細(xì)菌有無動力。

(1)材料

半固體培養(yǎng)基。

細(xì)菌斜面培養(yǎng)物。

(2)方法

①將接種針經(jīng)火焰滅菌冷卻后,從斜面培養(yǎng)物表面沾取細(xì)菌。

②用無菌法穿刺接種,將接種針刺入半固體培養(yǎng)基正中央,深度達(dá)距管底0.5cm處停止,然后循原路退出。注意在刺入及拔出時要保持接種針不向穿刺線外擺動。

③試管口通過火焰滅菌,塞上棉塞。接種針經(jīng)火焰滅菌。培養(yǎng)物放37℃恒溫箱中培養(yǎng)。

(3)結(jié)果:有動力的細(xì)菌呈擴(kuò)散生長,無動力的細(xì)菌沿穿刺線生長。


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